109 / 2021-10-21 16:33:05

α-芋螺毒素MI分支肽的合成及免疫原性研究

α-芋螺毒素,八分支肽,点击反应,抗血清,中和活性

α-芋螺毒素MI分支肽的合成及免疫原性研究

陈荣芳^1,2，余硕²，周良燚²，张学荣¹，戴秋云²



1.广西医科大学蛇毒研究所，广西医科大学基础医学院，广西 南宁 530021；2.军事科学院军事医学研究院 生物工程研究所，北京 100071



为探索α-芋螺毒素MI的解毒方法，研究MI分支肽抗原的合成方法、免疫原性及抗血清对MI的解毒活性，本工作采用固相多肽合成法（SPPS）合成含炔基MI线性肽及含叠氮赖氨酸分支肽，空气氧化得含炔基MI，通过铜（Cu（I））催化叠氮-炔杂环加成反应合成多分支肽。4次免疫Balb/c小鼠制备抗血清，ELISA法测定血清抗体滴度，然后MI与抗血清混合注射KM小鼠，测定抗血清的保护效果。结果表明：成功合成了MI八分支肽，N端连接的MI八分支肽的免疫原性差，10、20 μg/只剂量组第4次免疫后的血清抗体滴度分别为1:400及1:6400，C端连接的MI八分支肽的免疫原性较高，10、20 μg/只剂量组第4次免疫后的血清抗体滴度分别为1:3200及1:25600，各组200 μl抗血清与20 μg/kgMI混合后注射小鼠，小鼠均死亡，且死亡时间与对照组相比无显著差异。上述结果提示MI本身的抗原性不足，两种MI八分肽不能诱导高中和活性抗体，