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高速逆流色谱法分离纯化雪菊黄酮中的黄诺玛苷和马里苷

黄酮; 高速逆流色谱(HSCCC)；高效液相色谱(HPLC);纯化

高速逆流色谱法(HSCCC)是一种无任何固态载体的液-液分配的色谱分离技术。不同于传统的分离方法，它拥有制备量大，样品不会被污染、分离高效、回收率高等许多优点，所以，该技术被广泛的用于各天然产物中活性成分的制备分离。雪菊中黄酮类化合物非常丰富，且具有广泛的生物活性，但是目前对雪菊的生物实验研究一直以来受制于单品的获得。本实验则运用HSCCC从雪菊中分离出单品，对雪菊的开发和应用具有具有重要意义。
本文采用乙酸乙酯-正丁醇-水（4 : 1 : 5, V/V）溶剂体系，用HSCCC对雪菊提取物进行制备分离，结果如图1所示。该体系下分离得到3个组分峰(Ⅰ-Ⅲ)，手动收集各组分并进行HPLC分析检测。其中峰Ⅱ为混合物，未能成功分离得到纯品。峰Ⅰ和峰Ⅲ的液相色谱图，均为单峰，且分别与黄诺玛苷、马里苷标准品的HPLC检测的保留时间及紫外特征吸收峰一致，各得到4.9 mg和15.8 mg，纯度分别为94.5%和99.0%，回收率均大于97%。再经NMR与LC-MS检测并与文献对比，鉴定此两个峰分别为黄诺玛苷和马里苷。